IV turdagi gripp virusi uchun tovuq embrionini yig'ish suyuqligining quyi oqimida tozalash jarayonini optimallashtirish bo'yicha tadqiqot (1-qism)

Gripp (shuningdek, gripp deb ham ataladi) turli xil nafas olish kasalliklarini keltirib chiqarishi mumkin bo'lgan o'ta yuqumli respiratorli yuqumli kasallikdir. Jahon sog'liqni saqlash tashkilotining (JSST) nufuzli ma'lumotlariga ko'ra, har yili taxminan bir milliard odam gripp virusi tahdidi ostida. Gripp viruslari (IV) Orthomyxoviridae oilasiga mansub bo'lib, bir -manfiy{3}}sezuvchi RNK viruslaridir. Gripp virusi zarralari sharsimon, diametri 80-120 nm bo'lib, ularning tuzilishi tashqi tomondan uchta qatlamga bo'linishi mumkin: konvert, matritsa oqsillari va yadro.

 

A va B gripp viruslarining tuzilishi

Antiviral preparatlar va grippga qarshi to'g'ridan-to'g'ri emlash grippni davolash va oldini olishda hal qiluvchi qadamdir. Hozirgi vaqtda tovuq embrioni matritsasi va hujayra matritsasi grippga qarshi embrion tadqiqotlarida keng qo'llaniladigan usullardir, tovuq embrionlari mahalliy va xalqaro tadqiqotchilar tomonidan gripp virusi suyuqligini tayyorlash uchun eng ko'p tanlangan tanlovdir. Tovuq embrioni allantoik virusli suyuqlik tarkibida ovalbumin va virusli strukturaviy oqsillar kabi ko'plab aralashmalar mavjud. Ovalbumin vaksina{3}}immunlangan odamlarda allergik reaktsiyalarni keltirib chiqarishi mumkin bo'lgan muhim komponent hisoblanadi. Shuning uchun tovuq embrioni allantoik virus suyuqligini tozalash, kontsentratsiyalash va tozalash gripp virusiga qarshi vaktsinalarni ishlab chiqishda muhim qadamdir.

Hozirgi vaqtda keng tarqalgan bo'lib foydalaniladigan virusli suyuqlikni tozalash texnologiyasi - bu santrifüj + chuqur filtrlash. Gripp virusini tozalashning asosiy usullariga ultrafiltratsiya, ultratsentrifugalash, gel filtrlash xromatografiyasi va estrodiol xromatografiya kiradi.

Ushbu tadqiqot 9-11 kunlik tovuq embrionlarida to'rtta gripp virusi-H1N1, H3N2, BV va BY-ning infektsiya xususiyatlarini o'rganishga qaratilgan. Bir valentli virusli allantoik suyuqlik tovuq embrioni madaniyati orqali keyingi virusli qayta ishlash uchun asosiy materialni ta'minlash uchun olingan. Tadqiqot davomida maqsadli oqsilni boshqa komponentlardan (turli xil oqsillar va ovalbumin kabi) ajratishni optimallashtirish uchun turli xil tushuntirish, kontsentratsiya va tozalash usullari solishtirildi.

Eksperimental texnologiya yo'l xaritasi

Tovuq embrionlari 37 daraja haroratda 9-11 kun davomida ekilgan. Keyin ular 1:10000 MOIda A gripp virusi (H1N1 uchun A1, H3N2 uchun A3) va 1:10000 MOIda B gripp virusi (BV uchun B1, BY uchun B2) bilan emlangan. H1N1 va H3N2 viruslari 33-34 darajada 48 soat davomida, BV va BY viruslari esa 33 darajada 7,2 soat davomida ekilgan. Keyin embrionlar sovutilgan va allantoik suyuqlik yig'ilgan. Allantoik suyuqlik yuqori umumiy protein tarkibiga ega, yuqori yopishqoqlikka ega va loyqa ko'rinishga ega bo'lib, aniqlik kiritishni qiyinlashtirdi.

Turli xil tushuntirish jarayonlarining IV turdagi gripp virusi yig'im suyuqligi sifatiga ta'siri

Aniqlash tozalash jarayonining muhim bosqichi bo'lib, ko'p miqdordagi erimaydigan aralashmalar uchun dastlabki ishlov berish vazifasini bajaradi. Ushbu bosqichda xom ashyo sifatida allantoik suyuqlik ishlatiladi. Uzluksiz oqim yuqori{2}}tezlikli santrifüjdan so‘ng suyuqlik tindiriladi va g‘ovak o‘lchamlari 3 mkm va 0.8+0.45 mkm va 3 mkm va 0.8+0.65 mkm bo‘lgan filtr kartrijlari orqali filtrlanadi. Ikkita filtr kartrij o'lchamlarining aniqlashtirish jarayoni va natijalariga ta'siri o'rganiladi va optimal tushuntirish jarayonini aniqlash uchun mos tushuntirish sxemasi tanlanadi.

To'rt turdagi gripp virusi tiniqlashtiruvchi suyuqlik sinovlari natijalari 1-3 .-rasmlarda ko'rsatilgan CA1-1 3 mkm va 0.8+0.65 mkm filtrli lentalari yordamida sinovdan o'tkazilgan tiniqlashtiruvchi suyuqlik natijalarini, CA1-2 3 mkm va 0.8+0.45 mkm. va shunga o'xshash filtr yordamida sinovdan o'tkazilgan tiniqlashtiruvchi suyuqlik natijalarini ko'rsatadi.

Shakl 1. Gripp virusining aniqlangan eritmasi - umumiy protein tarkibini aniqlash natijalari

2-rasm. Gripp virusi aniqlangan eritmasi - gemagglyutinatsiya titrini aniqlash natijalari

Shakl 3. Gripp virusi aniqlangan eritmasini aniqlash natijalari - oqsillarni olib tashlashning umumiy tezligi

Natijalar shuni ko'rsatdiki, guruhlar o'rtasida umumiy protein miqdori va umumiy oqsilni olib tashlash tezligida raqamli farqlar mavjud bo'lsa-da, sezilarli farqlar yo'q. Buning sababi, filtr kartridjlarining g'ovak o'lchamlari juda kichik bo'lishi mumkin va ularning barchasi tushuntirish talablariga javob berishi mumkin. Qon koagulyatsiyasi titriga kelsak, 3 mkm va 0.8+0.45 mkm filtrli kartridjlar yuqori qon ivish titrlarini ko'rsatdi. Shuning uchun optimal aniqlik uchun 3 mkm va 0.8+0.45 mkm filtrli kartridjlarning kichikroq gözenek o'lchamlari tanlangan.

Adabiyotlar: Huang, Zhentian. To'rt valentli gripp virusi split vaktsinasi uchun quyi oqim ishlab chiqarish jarayonini optimallashtirish [D]. Shenyang qishloq xo'jaligi universiteti, 2024. DOI: 10.27327/d.cnki.gshnu.2024.001595.